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Western Blot小分子蛋白检测效果差的原因及解决方案

Western blot广泛应用于特定组织/细胞中目标蛋白是否出现及其量变、位移等分析,是实验室里最常用的蛋白分析平台。但由于其中技术环节较多,获得稳定一直、高质量的结果也并非易事。下面介绍WB过程中出现小分子蛋白检测效果差的原因和解决方案。


现象
可能的原因
改善建议
小分子蛋白检测效果差
小分子蛋白被大分子封闭剂(如BSA)掩蔽
考虑换用酪蛋白或低分子量聚乙烯吡咯烷酮(PVP)



将Tween和Triton-100等表面活性剂减少到最少量



避免与抗体及漂洗液孵育次数过多

注:小分子蛋白转膜时间要相应的缩短,最好采用0.2 um 的PVDF膜,有利于小分子蛋白(<20kDa)的结合。


(乐研生物 www.loybio.com)

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标签Western_Blot
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本帖被以下淘专辑推荐:

共 11 个关于【Western Blot小分子蛋白检测效果差的原因及解决方案】的回复 最后回复于 2014-2-18 23:42

苞米花的花 发表于 2014-1-11 07:11:04 | 显示全部楼层
不错!顶LZ
断了弦 发表于 2014-1-18 21:28:04 | 显示全部楼层
不错不错 支持下,又学习到新知识了
白开心 发表于 2014-1-21 15:47:11 | 显示全部楼层
很不错的哦,支持,加油
暗暗一笑 发表于 2014-2-1 07:24:40 | 显示全部楼层
学习一下!十分感谢
竹叶 发表于 2014-2-1 13:56:50 | 显示全部楼层
学习了
永不生气 发表于 2014-2-3 00:15:29 | 显示全部楼层
支持一下,期待更多东西
西湖鱼 发表于 2014-2-3 11:09:41 | 显示全部楼层
不错!顶楼主
三月阳光 发表于 2014-2-3 15:48:51 | 显示全部楼层
不错不错 支持下,又学习到新知识了
沸水 发表于 2014-2-10 07:13:24 | 显示全部楼层
找了老半天终于在这里看到了!非常感谢!
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