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本帖最后由 统统 于 2012-12-16 13:56 编辑

常见问题解决:western blot 无信号

Western blot广泛应用于特定组织/细胞中目标蛋白是否出现及其量变、位移等分析,是实验室里最常用的蛋白分析平台。但由于其中技术环节较多,获得稳定一直、高质量的结果也并非易事。做了半天的WB,结果没有信号,特别是一些新做的一个抗体,很让人恼火外带伤心。下面列举了造成Western Blot 无信号的可能原因和改善建议:


现象
可能的原因
改善建议
无信号
抗体浓度过低
增加一抗和二抗的浓度


HRP被抑制
HRP标记抗体不能在含有叠氮化钠的溶液中使用


一抗采用天然蛋白制备
以非变性胶电泳分离蛋白或采用变性抗原制备的抗体

(乐研生物 www.loybio.com)



标签Western_Blot
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