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抗体

抗体是指能够特异性结合抗原的免疫球蛋白(糖蛋白),抗原则是引起易感动物体内产生抗体的物质。抗体以一个或多个由四条多肽链组成的 Y 形单体存在。每个 Y 形结构包含两条相同的重链和两条相同的轻链,重链和轻链是根据它们的相对分子量命名的。Y 形结构的顶部包含可变区,也就是抗原结合点。

任何一种抗体的轻链都可分为 kappa (κ) 型或 lambda (λ) 型(根据多肽结构的细微区别);而重链决定了各个抗体的亚类。

  • 重链

哺乳动物的 Ig 重链有 5 种,分别用希腊字母 α、δ、ε、γ 和 μ 来命名。重链类型又限定了抗体的类别,这些重链分别存在于抗体 IgA、IgD、IgE、IgG 以及 IgM 中。每一条重链有两个区域:恒定区与可变区。恒定区在同型的所有抗体中都是一样的,但不同型的抗体之间则有差异。γ、α 以及 δ 型重链具有由三个 Ig 结构域串联而成(排成一行)的恒定区,并且还有一个用于增加灵活性的铰链区;而 μ 及 ε 型重链则具有由四个 Ig 结构域组成的恒定区。不同 B 细胞所生产抗体的重链可变区是不同的,但是同一个 B 细胞及其克隆所生产的所有抗体其可变区则是相同的。

  • 轻链

哺乳动物的轻链仅有两种:lambda (λ) 和 kappa (κ)。轻链具有两个连续的结构域:一个恒定结构域和一个可变结构域。每一个抗体含有的两条轻链始终相同,哺乳动物中每一个抗体只存在一种类型的轻链。



抗体的示意图

抗体的示意图


同型对照抗体(Isotype Controls)

  • 定义:使用与一抗相同种属来源、相同亚型、相同剂量和相同的免疫球蛋白及亚型的免疫球蛋白,用于检测由于抗体非特异性结合到组织或细胞而产生的背景染色。
  • 分类:同型对照免疫球蛋白亚类包括IgG1、 IgG2a、 IgG2b 和IgM。
  • 作用:同型对照的单克隆抗体用于评估一抗与细胞表面抗原的非特异性结合。
  • 原理:非特异性结合的产生是由于Fc段结合或蛋白间相互作用。
  • 特征:同型对照与组织切片或细胞的表面抗原无交叉反应。
  • 使用原则:同型对照应用与一抗相同的浓度和染色条件。

Isotype Control monoclonal antibodies are used to estimate the non-specific binding of target primary antibodies to cellsurface antigens. Non-specific binding is due to Fc receptor binding or other protein-proteininteractions. Isotype controls show negligible cross-reactivity with cellsurface antigens on tissue sections or in cellular preparations. IsotypeControls should be used at identical concentrations and staining conditions asthe target primary antibodies. Isotype controls are available for manyimmunoglobulin subclasses. The isotype control immunoglobulin (Ig) subclassesare IgG1, IgG2a, IgG2b and IgM.
(乐研生物 www.loybio.com

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共 0 个关于【同型对照抗体的概念及选择原则】的回复 最后回复于 2012-11-29 23:04

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