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    2017年以来,CRISPR技术可谓是来势汹涌!各种关于CRISPR技术研究铺天盖地。
    最近,CRISPR技术又登新高峰。据消息,8月14日,来自于耶鲁大学、瑞士巴塞尔大学的研究团队在《Nature Neuroscience》期刊在线发表最新研究成果——利用改造版CRISPR技术寻找到导致脑胶质母细胞瘤的基因突变。

CRISPR技术又登新高峰 直指恶性脑瘤

CRISPR技术又登新高峰 直指恶性脑瘤

       Sidi Chen和巴塞尔大学Randall Platt教授课题组合作开发了一种改良版的CRISPR基因编辑和筛选技术(由腺相关病毒介导),以患有胶质母细胞瘤的小鼠为模型,寻找致癌的主要驱动基因。他们评估了超1500种基因突变组合,从中发现了多种可能引发癌症的组合,例如B2m-Nf1、Mll3-Nf1和Zc3h13-Rb1组合导致癌变。
    此外,他们还发现2个基因突变——Zc3h13和PTEN基因,通过影响Rb1基因突变的表达,增强肿瘤对化疗药物的耐药性。
    那如何将CRISPR技术用于研究领域呢?
不妨让我们把目光投向业内已推出CRISPR技术产品的生物公司,如广州往圣生物公司,以OneShine CRISPR/Cas9 基因敲除细胞文库为例:

CRISPR技术又登新高峰 直指恶性脑瘤

CRISPR技术又登新高峰 直指恶性脑瘤

      Lenti-CRISPR V2质粒图谱如上所示。gRNA与Cas9蛋白结合于同一个载体上。将设计合成好的12万个gRNA(靶向约2万个基因),分别连接到Lenti-CRISPR V2载体上,然后把12万个质粒混合起来,形成CRISPR/Cas9 基因敲除质粒文库。将此文库整合到了细胞中,一个125c㎡细胞培养瓶中含有约10^8个细胞,每个细胞被敲除了一个基因,共约2万个基因被敲除,所以含有每个特定基因缺陷的细胞约有5000个(10^8/2万)。最终得到的细胞后,仍可进行传代。
      目前该文库可用于人的胃癌、乳腺癌、结肠癌等癌细胞系和永生化的细胞系,可用于研究:
(1)新药靶点确定与验证
(2)环状RNA上游调控机制分析
(3)Long noncoding RNA作用机制验证
(4)脂肪代谢机制研究
(5)干细胞自我更新、不对称性分裂机制等。
     CRISPR技术仿佛进入井喷期,CRISPR技术在实际中的应用,如雨后春笋般不断涌现,然而CRISPR技术在某些研究中确实提供了方向,但是,如何达到预期效果还需我们不断地去探索!
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共 3 个关于【CRISPR技术又登新高峰 直指恶性脑瘤】的回复 最后回复于 2017-9-15 14:41

wangsheng0726 发表于 2017-9-15 14:41:48 | 显示全部楼层
一次性敲除2万个基因,OneShine™CRISPR/CAS9就是这么强大lollollol
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