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RNA转染实验效率低的原因

xiaoyu 于 2019-8-6 14:32 发表 [复制链接]

RNA转染效率低,可能的原因:

· 转染试剂不适合。建议选择RNA专用转染试剂,如Entranster-R4000,纳米材料,毒性低,效率高。

· 转染试剂和RNA的量不够,或者比例不对。优化实验条件,调整试剂和RNA用量,优化二者比例。

· 检测时间有问题。适当调整检测时间。

· RNA质量问题。选择纯度高的RNA。

· 细胞状态不佳。调整细胞状态,调整细胞融合度。

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共 1 个关于【RNA转染实验效率低的原因】的回复 最后回复于 2020-7-24 15:03

boyoushun321 发表于 2020-7-24 15:03:49 | 显示全部楼层

实时荧光定量PCR

一、试验简介

荧光定量PCR技术,即是在PCR反应体系中加入荧光物质,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,对未知模板进行定量分析的方法。具有应用范围广,灵敏度高,操作简便、特异性和可靠性更强、自动化程度高、无污染、具实时性和准确性等特点。

二、服务流程

三、服务要求:

(1)提供新鲜或保存完好的细胞(至少5×106)、动植物组织(至少50mg)、血液(300μl)等样本材料;

(2)提供样品的基因组DNA;

(3)纯化好的总RNA或反转录好的cDNA(OD260/OD280在1.9-2.1之间);

(4)提供待测基因序列或登录号,样品来源等。

四、订购信息:

服务名称        服务内容        周期        报价

基因组DNA提取        新鲜组织、血液、细胞、细菌、真菌        1-2周        60元/样品

总RNA提取        新鲜组织、血液、细胞        1周        60元/样品

反转录        提交cDNA第一条链        1周        50元/样品

相对定量SYBR法        上机检测,3次实验重复,数据分析        2-3周

3-4周        60元/样品(10-20个样品)

50元/样品(>40个样品)

绝对定量SYBR法        不包含标准品的制备        2-3周

3-4周        60元/样品(10-20个样品)

50元/样品(>40个样品)

标准品的制备        PCR扩增,载体构建和浓度测定        2周        1000元/样品

五、报告内容:

实验方法,步骤,所用试剂,仪器,RNA/DNA浓度,电泳图片,扩增曲线,熔解曲线,Ct值以及数据统计分析(可选),保留剩余引物和模板。

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